As bactérias do tubo 1 (aeróbias estritas) se desenvolvem somente em regiões do meio de cultura próximas do ar, onde obtêm oxigênio.
As do tubo 2 (anaeróbias estritas) crescem somente na zona profunda no tubo 2, onde a presença de oxigênio é escassa.
As do tubo 3 (anaeróbias facultativas) se desenvolvem em ambientes com presença ou ausência de oxigênio, podendo viver em várias profundidades do tubo.